{"id":174,"date":"2016-03-09T14:00:44","date_gmt":"2016-03-09T14:00:44","guid":{"rendered":"http:\/\/newsite.matthewlee.org\/?page_id=174"},"modified":"2016-06-01T13:25:41","modified_gmt":"2016-06-01T13:25:41","slug":"extraccion-de-meiofauna-con-ludox","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/meiochile.matthewlee.org\/?page_id=174","title":{"rendered":"Extracci\u00f3n de Meiofauna con Ludox"},"content":{"rendered":"

Esta informaci\u00f3n sobre el tratamiento de muestras has sido proporcionada por el Proyeto Darwin Nematode<\/a>, sitio mantenido por el Plymouth Marine Labs, Reino Unido (con la autorizaci\u00f3n correspondiente).
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Las muestras de sedimento fijadas, adem\u00e1s de la fauna, contienen una mezcla de formalina y componentes de sedimento como cieno, arcilla, granos de arena y detrito org\u00e1nico. Aunque los siguientes m\u00e9todos son con frecuencia referidos como \u2018extracci\u00f3n de fauna\u2019, en realidad lo que pretendemos es sacar los multiples componentes del sedimento, y as\u00ed terminar solamente con la fauna de la muestra original.<\/p>\n

Suministro de agua libre de meiofauna: Antes de procesar las muestras es muy importante asegurarse que la fuente de agua dulce con la que se dispone en el laboratorio no contenga meiofauna. Para conseguir esto, escurra el agua dulce por un tamiz de 63 \u00b5m por 5-10 minutos y verifique el contenido retenido en el tamiz con la ayuda de una lupa binocular. Si registra meiofauna en el tamiz, es necesario que procure removerla. Muchas de las siguientes t\u00e9cnicas involucran lavando y concentrando la meiofauna en tamices con agua dulce. Se recomienda fijar una manguera flexible a la llave del lavatorio, esto le permitir\u00e1 aumentar el control sobre la direcci\u00f3n y fuerza del flujo. Debido a que la meiofauna es peque\u00f1a, se recomienda no usar un chorro fuerte de agua para evitar con ello el salpicado de las muestras.<\/p>\n

1 Sacando cieno\/arcilla y fragmentos grandes<\/em><\/p>\n

El primer lavando de la muestra con agua dulce y sobre una tamiz de 63 \u00b5m elimina los componentes de sedimento fino, cieno y arcilla, y gran parte de la formalina. Tenga cuidado de no sobrecargar el tamiz, muestras grandes y fangosas pueden requerir ser tamizadas en cantidades peque\u00f1as. \u2018Puddling\u2019 puede ser \u00fatil si el tamiz se satura. Siga lavando hasta que el agua que pasa por el tamiz salga relativamente transparente. Para algunos sedimentos finos, especialmente si las muestras iniciales son peque\u00f1as, este procedimiento es suficiente para reducir la muestra hasta una cantidad que puede ser extra\u00eddo con Ludox (ver secci\u00f3n 4)<\/p>\n

Algunos tipos de muestras pueden contener cantidades significativa de materiales como hojas o fragmentos de papel. En tales circunstancias, ser\u00e1 \u00fatil remover este material lavando la muestra en una tamiz de 1 mm posicionado sobre el tamiz de 63 \u00b5m. Se requiere mucho cuidado para no obstruir el tamiz de trama mas peque\u00f1a porque este no es no puede verse directamente a simple vista. El contenidos de la tamiz 1 mm debe ser explorado bajo una lupa binocular para asegura que todo la meiofauna haya sido removida.<\/p>\n

2 Decantaci\u00f3n<\/em><\/p>\n

Si despu\u00e9s de lavado inicial, la muestra a\u00fan contiene apreciables cantidades de arena, esta puede ser removida por decantaci\u00f3n. Lave la muestra que queda en una probeta de 1 litro, con boca ancha y tapa (no intente con m\u00e1s de 150 ml de sedimento cada vez) y llene la probeta con agua dulce. Tape la probeta y vigorosamente agite e invierta la probeta 5-10 veces para distribuir el sedimento uniformemente en el volumen. Brevemente pare la probeta, probablemente por no mas de 5 segundos, hasta que la mayor\u00eda del material mas denso (principalmente arena) precipite, y entonces vierta cuidadosamente el liquido sobrante sobre una tamiz de 63 \u00b5m. Repetir 3-6 veces. Como el pr\u00f3ximo proceso es la extracci\u00f3n con Ludox (ver secci\u00f3n 4), no se preocupe si hay un poco sedimento fino en el tamiz de 63 \u00b5m. Es una buena pr\u00e1ctica chequear por meiofauna en una muestra del sedimento que queda en la probeta antes de descartarlo. Esto es particularmente importante si la muestra es una de las primeras muestras que se procesan de una nueva investigaci\u00f3n.<\/p>\n

3 Preparaci\u00f3n del Ludox<\/em><\/p>\n

El objetivo de la extracci\u00f3n por flotaci\u00f3n es suspender la fauna un fluido que tiene un peso espec\u00edfico muy cercano al de la fauna, de este modo la fauna que es neutralmente flotante permanecer\u00e1n flotando y pero los sedimentos que son negativamente boyante y se hundir\u00e1n. En el pasado, una variedad de fluidos densos han sido usados para extraer fauna de sedimento. La desventaja de la mayor\u00eda de estos fluidos, como NaCl o sucrosa, es que estos poseen un potencial osm\u00f3tico muy alto y por eso pueden provocar da\u00f1os en parta de la fauna. Ludox es una soluci\u00f3n de s\u00edlice coloidal, principalmente desarrollada parar uso en fundiciones de hierro, con propiedades que la hacen ideal para la extracci\u00f3n de meiofauna. Ludox esta disponible en un rango de grados, pero Ludox TM es el tipo mas ampliamente usado. El Ludox TM comercializado tiene un peso espec\u00edfico de 1.13 a 1.14. El peso espec\u00edfico requerido para la extracci\u00f3n de meiofauna es aproximadamente 1.15, por lo tanto la soluci\u00f3n est\u00e1ndar debe ser diluida. Agregando dos partes de Ludox por tres partes de agua dulce producir\u00e1n una soluci\u00f3n con una densidad aproximadamente correcta, pero la densidad debe ser medida con un dens\u00edmetro. No use agua de mar directamente con Ludox, debido a que esto causar\u00e1 precipitaci\u00f3n de silicio, desperdiciando la muestra in\u00fatil.<\/p>\n

Ludox es una soluci\u00f3n de s\u00edlice coloidal. Peque\u00f1os derrames pueden secarse y transformarse en s\u00edlice, el cual es nocivo. Los derrames deben ser fregados y limpiados inmediatamente y cuidado debe ser tomado cuando se use Ludox. Tamices, cristaler\u00eda, y otros equipos como picetas, que han sido usadas con Ludox deben ser empapados en una soluci\u00f3n diluida de NaOH y luego enjuagados con agua caliente.<\/p>\n

4 Flotaci\u00f3n con Ludox<\/em><\/p>\n

Numerosas t\u00e9cnicas de centrifugaci\u00f3n que involucran Ludox ha sido usadas, sin embargo el siguiente m\u00e9todo ha sido considerado sencillo y eficaz. Despu\u00e9s de la decantaci\u00f3n, o si despu\u00e9s del lavado inicial la muestra contiene una peque\u00f1a cantidad de material, movilice con el lavado cuidadosamente la porci\u00f3n extra\u00edda de sedimento a un lado del tamiz, y luego utilizando Ludox depos\u00edtelo en un baso de precipitado alto. Agregue Ludox en un volumen por lo menos 10 veces el volumen de la muestra, hasta un peso especifico de 1.15. Revuelva con vigor para distribuir la muestra uniformemente por todo el volumen y deje sedimentar por al menos 40 minutos hasta que aparezca una clara separaci\u00f3n entre la meiofauna flotante por arriba del Ludox y el sedimento al fundo de la baso de precipitado. Algunas part\u00edculas finas de arcilla puede permanecen en la muestra incluso despu\u00e9s del lavando y la decantaci\u00f3n y estas van a permanecer en suspensi\u00f3n aun despu\u00e9s de algunas horas. Ellos deben ser ignorados debido a que ellos pasaran por el tamiz de 63 \u00b5m. Cuidadosamente vierta el sobrante l\u00edquido a trav\u00e9s de un tamiz de 63 \u00b5m hasta una jarra. Devuelva la Ludox a la muestra y repita el proceso de flotaci\u00f3n 2 a 4 veces m\u00e1s. Puede ser necesario chequear que el peso espec\u00edfico del Ludox no haya sido modificado por el agua presente en la muestra de sedimento despu\u00e9s del primer lavado, si es necesario agregue mas Ludox concentrado para retornar al peso espec\u00edfico a 1.15. Despu\u00e9s de cada flotaci\u00f3n lave la fauna extra\u00edda con agua dulce. Si no quiere trabajar inmediatamente con la muestra, cons\u00e9rvela en un envase apropiado de vidrio y tapa pl\u00e1stica en una soluci\u00f3n de alcohol al 70% con glicerina al 5% glicerina o formalina al 4%.<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

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